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Medios

Tabla de composición de medios

 Freezing Medium and Culture Medium for Mouse Reproductive Engineering

  Mouse General Freezing and Culture Medium

   Reproductive Engineering Manuals

DMSO 1M

Nombre del compuesto mL Vendedor Número de catalogo
DMSO 1.56 Sigma D 2650
PB1 18.44 - -

PB1

Nombre del compuesto mg/100ml Vendedor Número de catalogo
NaCl 800.0 Sigma S 5886
KCl 20.0 Sigma P 5405
CaCl2 12.0 Sigma C 5670
KH2PO4
20.0 Sigma P 5655
MgCl2 6H2O
10.0 Sigma M 2393
Na2HPO4 115.0 Sigma S 5136
Na-Pyruvate 3.6 Sigma P 4562
Glucose 100.0 Sigma G 6152
Penicillin 7.5 Sigma P 7794
Streptomycin 5.0 Sigma S 1277
BSA 300.0 Sigma A 4378

Referencias
Nakao K., Nakagata N., and Katsuki M. 1997. Simple and effcient procedure for cryopreservation of mouse embryos by simple vitrification. Exp. Anim. 46: 231-234.

DAP213

2M DMSO, 1M Acetamide, 3M Propylene Glycol in PB1

Composición del PB1

Nombre del compuesto mg/100ml Vendedor Número de catalogo
NaCl 800.0 Sigma S 5886
KCl 20.0 Sigma P 5405
CaCl2 12.0 Sigma C 5670
KH2PO4
20.0 Sigma P 5655
MgCl2 6H2O
10.0 Sigma M 2393
Na2HPO4 115.0 Sigma S 5136
Na-Pyruvate 3.6 Sigma P 4562
Glucose 100.0 Sigma G 6152
Penicillin 7.5 Sigma P 7794
Streptomycin 5.0 Sigma S 1277
BSA 300.0 Sigma A 4378
  • Primero se preparan la solución A y la solución B para que estén totalmente disueltas.
  • Se mezclan volúmenes iguales de A y B para obtener el DAP213.
Atención: La solución puede volverse opaca cuando se le agrega el DMSO.

Solución A

Nombre del compuesto mL (Final volume 10mL) Vendedor Número de catalogo
PB1 2.3088 - -
DMSO 3.1252 Sigma D 2650
Propylene glycol (PG) 4.556 Sigma P 1009

Solución B

Nombre del compuesto mg/10mL in PB1 Vendedor Número de catalogo
Acetamide (AA) 1181.4 Sigma A 0500

Referencias
Nakao K., Nakagata N., and Katsuki M. 1997. Simple and effcient procedure for cryopreservation of mouse embryos by simple vitrification. Exp. Anim. 46: 231-234.

Sacarosa 0.25M

Composición del PB1

Nombre del compuesto mg/100ml Vendedor Número de catalogo
NaCl 800.0 Sigma S 5886
KCl 20.0 Sigma P 5405
CaCl2 12.0 Sigma C 5670
KH2PO4 20.0 Sigma P 5655
MgCl2 6H2O 10.0 Sigma M 2393
Na2HPO4 3.6 Sigma S 5136
Na-Pyruvate 3.6 Sigma P 4562
Glucose 100.0 Sigma G 6152
Penicillin 7.5 Sigma P 4687
Streptomycin 5.0 Sigma S 1277
BSA 300.0 Sigma A 4378

0.25M Sucrose in PB1

Nombre del compuesto mg/20ml in PB1 Vendedor Número de catalogo
Sucrose 1711.5 Sigma S 1888

Referencias
Nakao K., Nakagata N., and Katsuki M. 1997. Simple and effcient procedure for cryopreservation of mouse embryos by simple vitrification. Exp. Anim. 46: 231-234.

mHTF

Nombre del compuesto mg/100ml Vendedor Número de catalogo
NaCl 593.8 Sigma S 5886
KCl 35.0 Sigma P 5405
MgSO4 7H2O 4.9 Sigma M 7774
KH2PO4 5.4 Sigma P 5655
CaCl2 57.0 Sigma C 5670
NaHCO3 210.0 Sigma S 5761
Glucose 50.0 Sigma G 6152
Na-lactate (mL)* 0.34mL Sigma L 7900
Na-Pyruvate 3.7 Sigma P 4562
Penicillin G 7.5 Sigma P 4687
Streptomycin 5.0 Sigma S 1277
BSA
(Albumin, Bovine serum, Fraction V, Fatty Acid-Free)
400 MERCK/CALBIOCHEM 126575
0.5% phenol red (mL) 0.04mL Sigma P 0290

* Assay; 70%

Referencias
Kito S., Hayao T., Noguchi-Kawasaki Y., Ohta Y., Hideki U., and Tateno S. 2004. Improved in vitro fertilization and development by use of modified human tubal fluid and applicability of pronucleate embryos for cryopreservation by rapid freezing in inbred mice. Comp. Med. 54(5): 564-570.

KSOM

Nombre del compuesto mg/100ml Vendedor Número de catalogo
NaCl 555 Sigma S 5886
KCl 18.5 Sigma P 5405
KH2PO4 4.75 Sigma P 5655
MgSO4 7H2O 4.95 Sigma M 7774
CaCl2 2H2O 25 Sigma C 7902
NaHCO3 210 Sigma S 5761
Glucose 3.6 Sigma G 6152
Na-Pyruvate 2.2 Sigma P 4562
DL-Lactic Acid, sodium salt 0.174ml Sigma L 1375
10mM EDTA 100µl Sigma E 6635
Streptomycin 5 Sigma S 9137
Penicillin 6.3 Sigma P 7794
0.5% phenol red 0.1ml Sigma P 0290
L-Glutamine 14.6 Sigma G 8540
MEM Essential Amino Acids 1ml Gibco 11130-051
MEM Non-essential AA 0.5ml Sigma M 7145
BSA 100 Sigma A 4378

Referencias
Lawitts J.A., and Biggers J.D. 1993. Culture of preimplantation embryos. Methods Enzymol. 225:153-164.